怎样取植物样本用来验DNA
你可百度一下“植物DNA提取”,就会有很多实验方法出来了。
如:植物DNA的CTAB提取法:
1 称取新鲜叶片2-3g,剪碎放入研钵中,在液氮中研磨成粉末。2 将粉末转移到的加有7ml经预热的1 5×CTAB提取缓冲液15ml离心管中,迅速混匀后置于65℃水浴中,温育30min。3 取出离陆斗心管,冷却至室温,加入氯仿/异戊醇(24:1),充分混匀,室温下2300×g离心20min。4 将上清转移至另一新的15ml离心管掘悉模中,加入1/10体积10%的CTAB和等体积的氯仿/异戊醇。充分混判缓匀,2300×g离心20min。5 转移上清至另一新的15ml离心管中,加入等体积1%的CTAB沉淀缓冲液,轻轻摇晃至形成DNA絮状沉淀。1000×g离心10min,使DNA沉淀于管底。6 加入1 5-2ml的1mol/LNaCl及5μlRNase置于56℃水浴中过夜。待DNA完全溶解后,加2-3ml4℃预冷的95%的冰乙醇使DNA沉淀,挑出DNA,置于1 5ml离心管中,用70%乙醇清洗30min,用离心机甩5s,倒出70%乙醇,再用95%乙醇浸泡5min,倒出95%乙醇,在超净工作台上吹干。7 将风干的DNA直接在4℃保存备用或溶于100μlTE溶液中于-20℃保存。
植物DNA提取的原理和方法是什么?
原理就是去掉植物春迟辩细胞壁
细胞膜
质体
线粒体
叶绿体
剩下细胞核了。就是DNA了。
通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含扒缺有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用。
十二烷基肌酸钠(sarkosyl)、十六烷基三甲基溴化铵(hexadyltrimethyl
ammomum
bromide,简称为CTAB)、十二烷基硫酸钠(sodium
dodecyl
sulfate,简称SDS)等离子型表面活性剂,能溶解细胞膜和核膜蛋白,使核蛋旦拿白解聚,从而使DNA得以游离出来。再加入苯酚和氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于TE溶液中,即得植物总DNA溶液
有什么很简单的方法提取植物的DNA
将植物放入研磨器中,加入洗涤剂研老悔磨,然后倒入烧派含孙尘链杯,加无水乙醇,用玻璃棒轻轻搅拌,会发现白色丝状物缠绕在玻璃棒上,这就是DNA
有 提取植物线粒体中DNA的具体步骤啊??
首先用果胶酶和纤维素酶将植物细胞的细胞壁去掉
然后将原生质层放入清水中,让细胞吸胀破裂
再通过离心的方法分掘拆离出细胞器,并提取线粒体
将线粒体研磨配成溶液
由于线粒体的组成有水、蛋白质和脂质
将溶液过虑,然后用浓盐法提取并提纯DNA.,4,首先先用果胶判如酶和掘散启纤维素酶让植物的细胞壁去掉
然后在让植物细胞吸水胀破,让细胞器都出来
再通过密度梯度离心的方法分出细胞器
分出线粒体后,将线粒体磨碎,融入水中,过滤。
很后就是线粒体的DNA了,0,EXTRACTION OF MITOCHONDRIAL NUCLEIC ACIDS FROM FRACTIONATED MITOCHONDRIA
1. Resuspend the pelleted mitochondria in 0.2 mL of mitochondrial nucleic acids
extraction buffer. Add 4 µL of a 1...,0,问医生,0,
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